桿狀病毒是一類具有囊膜的雙鏈DNA病毒，在自然界中的天然宿主是鱗翅目、膜翅目和雙翅目昆蟲。目前應(yīng)用的昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)主要有AcMNPV和家蠶核型多角體病毒，由于桿狀病毒具有較強的polyhedrin和P10啟動子，表達的外源蛋白能夠進行較好的修飾加工，具有良好的生物學(xué)活性，且其基因組可以插入較大片段外源DNA，所以昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)已被公認為是優(yōu)良的真核表達系統(tǒng)。

       桿狀病毒宿主域極窄，比如BmNPV僅僅能高效的感染家蠶或者家蠶細胞，但部分桿狀病毒可以轉(zhuǎn)導(dǎo)哺乳動物細胞，但是不能在哺乳動物中復(fù)制，因此對人畜無害。由于部分桿狀病毒可以轉(zhuǎn)導(dǎo)哺乳動物細胞，因此可以作為優(yōu)良的哺乳動物細胞基因轉(zhuǎn)移載體，已在基因治療、疫苗開發(fā)、藥物篩選以及基因調(diào)控研究等方面發(fā)揮巨大作用。近年來，國內(nèi)外許多學(xué)者致力于利用低溫(4℃)讓桿狀病毒停留在細胞膜上，然后利用外在的低pH誘導(dǎo)促使病毒在細胞膜表面和細胞融合，也可顯著提高對哺乳動物細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。也有通過在病毒表面展示外源蛋白來提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的報道，但是這需要對病毒進行額外的基因操作。如果能應(yīng)用操作簡便的方法提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率、進而提高外源基因表達量，可節(jié)省大量人力物力，達到事半功倍的效果。

       甲基倍他環(huán)糊精是倍他環(huán)糊精(β-CD)的烷基化衍生物，在食品及藥物中得到了廣泛應(yīng)用。本課題組研究發(fā)現(xiàn)，在利用BmNPV對哺乳動物細胞進行轉(zhuǎn)導(dǎo)前，先用一定濃度的MβCD孵育正常培養(yǎng)的細胞，孵育后，去除孵育液，再用BmNPV感染細胞，即可顯著提高BmNPV對哺乳動物細胞轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，最終增加了BmNPV對外源蛋白的表達量。利用MβCD提高BmNPV對哺乳動物細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率還未見研究報道，因此本發(fā)明是首次對這種提高桿狀病毒對哺乳動物細胞轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的方法做具體闡釋。

       甲基-β-環(huán)糊精在提高桿狀病毒對哺乳動物細胞轉(zhuǎn)導(dǎo)效率中的應(yīng)用，其步驟是用一定濃度的甲基倍他環(huán)糊精孵育正常培養(yǎng)的哺乳動物細胞，孵育30min后，去除孵育液，再用BmNPV轉(zhuǎn)導(dǎo)哺乳動物細胞，即可顯著提高BmNPV對哺乳動物細胞轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。部分桿狀病毒可以攜帶外源基因進入哺乳動物細胞，用于基因轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因治療載體。然而，桿狀病毒對哺乳動物細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率普遍較低，極大限制了其作為基因治療載體的應(yīng)用。本發(fā)明提供的方法可以有效提高桿狀病毒對哺乳動物細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，該方法操作簡單，易于理解。